胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)一直以來都是細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的寶貴資源,它富含生長因子、抗體和營養(yǎng)物質(zhì),是細(xì)胞生長和研究的重要組成部分。標(biāo)準(zhǔn)的胎牛血清采自5-8月齡牛胚胎。由于供體動(dòng)物的不同,可能會(huì)存在不同濃度的IgG。有些實(shí)驗(yàn)中
需要減少IgG的含量,本文將介紹低IgG胎牛血清的大致生產(chǎn)流程,僅供科普使用。
1. 采集胎牛血清
生產(chǎn)低IgG胎牛血清要從采集胎牛血液開始,選擇5-8月齡的牛胚胎。該過程需要在符合倫理規(guī)范和法律法規(guī)的條件下、以及符合當(dāng)?shù)匦竽敛块T相關(guān)規(guī)定的場地進(jìn)行。
2. 分離血清
一旦采集到胎牛血液,接下來的步驟是分離血清。這通常通過將血液在低溫下離心分離,得到含有血清的上清液。這個(gè)初步的血清通常包含相對較高濃度的IgG,因此后續(xù)的步驟將著重于降低其含量。
3.過濾
使用過濾器去除大分子成分,如細(xì)胞碎片等,以凈化血清。
4. 超濾或樹脂吸附
為了進(jìn)一步減少IgG的含量,可以使用超濾或樹脂吸附。超濾是通過孔徑合適的濾膜將大分子IgG分離出來,而樹脂吸附則是通過特定樹脂選擇性地吸附IgG,親和層析的原理祛除IgG。這兩種方法可以顯著減少IgG的含量,得到更低IgG含量的胎牛血清。
5. 質(zhì)量控制和認(rèn)證
生產(chǎn)低IgG胎牛血清后,必須進(jìn)行質(zhì)量控制和認(rèn)證。這包括檢驗(yàn)血清中IgG的含量、細(xì)菌和病毒的檢測,以確保血清符合相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定。只有通過認(rèn)證的血清才能用于細(xì)胞培養(yǎng)和研究。
總結(jié)起來,生產(chǎn)商品化的低IgG胎牛血清需要多個(gè)步驟。這一過程的目標(biāo)是提供高質(zhì)量、低IgG含量的血清,以支持細(xì)胞培養(yǎng)和研究的需求。通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和認(rèn)證,確保了低IgG胎牛血清的可靠性和可重復(fù)性,使其成為細(xì)胞生物學(xué)研究中重要的資源。