在實驗室的工作中,支原體污染會嚴重影響細胞實驗結(jié)果,使生物制藥工業(yè)產(chǎn)品的合格率下降。故對其的檢測非常重要。支原體的檢測方法有很多,培養(yǎng)法、DNA染色法、ELISA法,qPCR法等等。但是我們今天我們重點講一講qPCR法。
qPCR,顧名思義,就是在PCR的基礎上加入熒光基團,通過熒光信號的變化的實時監(jiān)測PCR的反應過程,最后通過對未知模板進行定量分析的方法。
熒光定量PCR法的出現(xiàn),極大地簡化了定量檢測的過程。它具有以下幾大特點:
1.時間短,2-3小時即可出結(jié)果;
2.靈敏度高、特異性強;
3.檢測結(jié)果可定量;
4.操作簡便,一臺機器即可
在和被喻為“金標準"的培養(yǎng)法的比較中。qPCR法檢測的時間短,只需兩個半小時左右即可出其結(jié)果;培養(yǎng)法在分離培養(yǎng)中,雖然是支原體檢測的“金標準",但是在支原體分離培養(yǎng)的過程中,要長出明顯克隆需要7-29天,時間長而且操作較為復雜,沒有辦法滿足實驗的需求。
在此特別為大家推薦德國MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測試劑盒,它具有高特異性,一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種,操作簡單,易于觀察,而且具有高靈敏度,最高檢測可達到≤10CFU/ml。