在細胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達到63%,因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養(yǎng)中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計細胞培養(yǎng)的同學(xué)就開始犯愁了,細胞培養(yǎng)的老手都知道,支原體污染非常不易察覺。有的實驗室被支原體污染后,如果不進行有效*的支原體清除,該實驗的細胞培養(yǎng)很難進行下去,細胞傳代3代以后狀態(tài)就急劇下滑,無法進行正常實驗,有的實驗室甚至只能指望換細胞間。那么怎樣才能有效檢測并清除支原體污染呢?
對于低流行地區(qū),PCR檢測人員經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)上崗后,核酸污染的風(fēng)險相對較小,但在疫區(qū)超負荷工作時,就可能會遇到核酸污染的問題,可通過以下措施降低污染機會:
1.正確佩戴手套:手套未緊密貼合拇指、食指和中指,在進行開蓋操作時容易發(fā)生交叉污染。
2.正確使用生物安全柜:簡單、整潔、避免通風(fēng)口堵塞;操作前后紫外線照射,消毒劑隨手可及;廢液缸里有1/3體積的含氯消毒液,并且及時清理廢液缸,保證廢物不超過廢液缸體積的2/3。
3.核酸提取儀去污染:每天多批次檢測時,在每一批次檢測完以后必須用75%的乙醇和核酸去除劑對儀器進行去污染。
4.重視通風(fēng):不定期對房間進行通風(fēng),每次至少持續(xù)30min。
5.PCR擴增區(qū)去污染:PCR反應(yīng)管必須蓋緊,避免擴增后的核酸對環(huán)境的污染。
6.實驗室隨手可及的消毒劑。
有沒有什么方法能夠簡單高效地祛除DNA污染呢?
當(dāng)然有:Minerva Biolabs PCR Clean™
通過中和以及降解的原理,可快速有效地祛除任何物體表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染,使它們快速的降解,從而確保PCR實驗結(jié)果的準(zhǔn)確。
使用方法也十分簡單:
將PCR Clean™噴在操作臺表面,反應(yīng)1分鐘后,即可用干凈紙巾擦干試劑。
注:如果沒有擦拭干凈,液體揮發(fā)后表面可能有白色殘留,影響美觀。此時可用噴壺噴灑蒸餾水到白色殘留處,然后擦拭即可。
針對移液器需要去除DNA污染,可按照說明書拆開移液器,將桿軸浸泡在PCR Clean™噴霧劑中,1分鐘后取出后用水沖洗,晾干,重新組合。
PCR Clean™的優(yōu)點:
1、快速:1分鐘起效。
2、方便:噴霧劑可直接使用。
3、保護實驗人員,避免接觸DNA污染。
4、穩(wěn)定性強:PCR Clean™耐熱,可在室溫保存至少一年。低溫可能會形成沉淀,但在37℃迅速溶解。即使在65°C條件下存放兩周,也不會影響噴霧劑的祛除效果。
5、成分安全:PCR Clean™含有少量的磷酸和乙氧基醇,成分非堿性,無致癌性。