在準(zhǔn)備篇中,小編詳細(xì)敘述了一下嬰兒配方食品測(cè)定葉酸時(shí),配置樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的步驟。在這次的菌種篇中,小編再詳細(xì)梳理一下測(cè)定菌的配置。
葉酸的測(cè)定菌是鼠李糖乳桿菌(ATCC7469),它實(shí)際上屬于干酪乳桿菌,不過是鼠李糖亞種。先制備貯備菌。先將它接種在分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(AOAC)推薦的乳桿菌瓊脂(貨號(hào)M366,HiMedia公司生產(chǎn))試管中,37℃孵育20小時(shí),再傳代2-3次,即可放入4℃冰箱儲(chǔ)存,1個(gè)月傳代1次,可傳30代。再次使用前,如果已保存數(shù)周,則需先將它在37℃培養(yǎng)20小時(shí),并傳2-3代,以保證菌種活力,再去制備接種液。
將貯備菌轉(zhuǎn)種到10ml微量維生素檢測(cè)接種肉湯(貨號(hào)M133)或乳酸桿菌肉湯(貨號(hào)M367)的試管中。35-37°C孵育24小時(shí),在無菌條件下離心,棄上清,再重懸于10ml無菌葉酸干酪培養(yǎng)基(貨號(hào)M543)中。再像之前一樣沉淀,并清洗一次。zui后重懸于10ml葉酸干酪培養(yǎng)基中,并用該培養(yǎng)基進(jìn)行1:100稀釋。之后即可在每個(gè)測(cè)定管中接種20μl菌液。塞好棉塞,37℃培養(yǎng)20-40小時(shí),直至獲得zui大渾濁度。在下一篇中,小編將向你介紹zui后的測(cè)定分析過程。
以上貨號(hào)培養(yǎng)基為HiMedia公司生產(chǎn),均可向北京締一生物購(gòu)買。其工藝及產(chǎn)品質(zhì)量均通過了ISO9001、ISO13485、WHO-GMP、CE和FDA認(rèn)證,質(zhì)量可靠,性能,產(chǎn)品行銷140多個(gè)國(guó)家。